免疫组化中各指标阳性的对照方法是什么

阳性对照包括选与检测样本组织类型匹配且考虑不同年龄人群差异的已知目标抗原阳性表达标准组织切片的阳性组织对照，以及用目标抗原稳定高表达且考虑性别影响的细胞系切片的阳性细胞对照；阴性对照有以磷酸盐缓冲液替代一抗其余步骤同实验组的试剂空白对照，还有用目标抗原明确阴性且注意病史影响的组织或细胞切片的已知阴性组织/细胞对照，以此排除假阳性保障免疫组化结果准确。

一、阳性对照方法

1.阳性组织对照：选取已知目标抗原呈阳性表达的标准组织切片作为对照，例如检测某癌抗原时，选用该肿瘤组织标本切片，通过对比实验系统下目标抗原的显色情况，验证实验流程能正确识别阳性表达，需考虑不同年龄人群组织中抗原表达可能存在差异，如儿童与成人组织的抗原丰度可能不同，应选择与检测样本组织类型匹配的阳性组织对照。

2.阳性细胞对照：采用目标抗原稳定高表达的细胞系切片作为对照，比如某蛋白在特定癌细胞系中持续高表达，利用该细胞系切片观察目标抗原的染色情况，确保实验体系能有效检测阳性信号，需关注性别对细胞内抗原表达的潜在影响，不同性别细胞内基因表达调控差异可能影响抗原表达水平，选择合适的阳性细胞对照以保障结果可靠。

二、阴性对照方法

1.试剂空白对照：用磷酸盐缓冲液（PBS）等替代一抗进行染色，其余步骤与实验组完全相同，观察是否有非特异性染色，以排除试剂本身带来的假阳性干扰，操作时需考虑不同生活方式人群的样本处理差异，如长期吸烟人群组织处理可能影响背景染色情况，通过试剂空白对照可清晰辨别背景染色与特异性染色。

2.已知阴性组织/细胞对照：选用目标抗原明确阴性的组织或细胞切片进行染色，对比观察染色结果，排除非特异性结合导致的假阳性，需注意病史对样本的影响，如患有特定疾病的样本可能存在异常抗原表达干扰，利用已知阴性对照能准确区分特异性与非特异性染色，确保免疫组化结果的准确性。