病情描述:新冠肺炎核酸怎么检查
主任医师 江苏省人民医院
新冠肺炎核酸检测主要通过采集呼吸道样本(如鼻咽拭子、口咽拭子),利用实时荧光RT-PCR技术检测病毒RNA,以判断是否存在病毒感染。检测流程包括样本采集与实验室检测两环节,其中样本采集需由医护人员规范操作以确保准确性。
一、检测样本类型
1.临床常用样本:以鼻咽拭子(灵敏度较高,尤其适用于成人及3岁以上儿童)、口咽拭子(操作简便,适用于无法耐受鼻腔刺激者或低龄儿童)为主;重症或咳嗽能力差的患者可采集痰液或肺泡灌洗液。
2.采集规范:采样前患者需避免进食、饮水30分钟以上,保持头部后仰45°张口呼吸(儿童需家长辅助固定头部);医护人员持拭子深入鼻腔5~8cm(鼻咽部)或口腔3~5cm(口咽部),旋转采样10秒后轻柔退出,确保拭子头充分接触黏膜。
二、检测技术与流程
1.核心技术:采用实时荧光RT-PCR法,通过逆转录将病毒RNA转化为cDNA,经PCR循环扩增后,以荧光信号强度判断病毒存在。国际标准以Ct值≤35(国内常用≤40)判定为阳性,Ct值>40判定为阴性。
2.实验室流程:样本冷藏运输(4℃可暂存2~4小时)→RNA提取(磁珠法或柱提法,需控制温度2~8℃)→RT-PCR扩增(反应体系含引物、探针及荧光染料)→结果判读(由双人核对Ct值并记录原始数据)。
三、特殊人群检测要点
1.孕妇:孕早期(12周内)避免经鼻拭子采集,以防刺激宫颈;孕中晚期建议由产科医生评估风险,必要时采用口咽拭子,操作中监测胎动,采样后静卧休息10分钟。儿童:3岁以下儿童优先口咽拭子,采用游戏化沟通(如“给小棉签找宝藏”)缓解紧张,采样后给予安抚奖励,避免因哭闹导致样本脱落。
2.老年人:75岁以上或行动不便者,需家属提前协助确认配合意愿,采样时监测血压、心率,避免因紧张诱发心脑血管意外;鼻腔术后(1个月内)者改用口咽拭子。
四、结果解读与临床应用
1.结果意义:单次阴性不排除感染,需结合流行病学史(14天内接触史)、症状(发热>37.3℃、咳嗽)及肺部CT异常(磨玻璃影)综合判断。若Ct值在35~40之间,建议12~24小时后重复检测或改用抗原检测辅助判断。
2.假阴性应对:高风险接触者若连续2次核酸阴性但症状持续,需考虑是否为:①采样时病毒载量低(如感染早期),建议更换痰液样本或肺泡灌洗液;②试剂失效或操作污染,可采用双试剂法复核。
五、质量控制与误差应对
1.机构资质:所有检测机构需通过《临床基因扩增检验实验室管理办法》认证,配备≥2名持证检验技师,每月开展室内质控(检测已知阳性/阴性对照品),确保批间差<10%。
2.误差来源:样本保存不当(如未冷藏>4小时)、操作时间>15分钟(病毒降解)、仪器污染(试剂残留),需严格执行“双人核对样本信息”“4℃内运输”“试剂开封后4小时内使用”原则。