病情描述:真菌感染怎么检查
主任医师 中日友好医院
真菌检测包含直接镜检按感染部位取标本如皮肤取鳞屑等用氢氧化钾处理镜检看菌丝孢子,真菌培养把标本接种特定培养基在适宜温度培养观察菌落等鉴定菌种,组织病理学检查对深部感染取病变组织制切片用PAS等染色观察真菌形态分布,血清学检查检测真菌相关抗体抗原有局限性需结合临床,分子生物学检查用PCR检测真菌核酸灵敏度高但对条件要求高且特殊人群标本采集要注意操作和评估。
一、直接镜检
1.标本采集:根据感染部位选取相应标本,如皮肤感染取病变边缘的鳞屑、毛发;呼吸道感染取痰液;消化道感染取粪便等。以皮肤标本为例,需用消毒刮刀刮取边缘活跃部位的鳞屑,操作时应注意无菌操作避免污染。2.镜检方法:将标本放置于载玻片上,加适量10%氢氧化钾溶液处理后加盖玻片,置于显微镜下观察。若发现真菌菌丝或孢子,提示可能存在真菌感染,该方法简便快速,可作为初步筛查手段,但只能确定是否有真菌,无法鉴别菌种。
二、真菌培养
1.标本接种:把采集的标本接种到沙保弱培养基等特定真菌培养基上,不同部位标本接种要求略有差异,例如痰液标本接种前可能需进行前处理以减少杂菌干扰。2.培养条件:一般在25-28℃环境下培养,根据真菌种类不同培养时间有所不同,通常需数天至数周。培养出真菌菌落后,通过观察菌落形态、颜色等特征并结合显微镜下菌丝和孢子形态进行菌种鉴定,能明确具体感染的真菌种类,为后续治疗提供依据。
三、组织病理学检查
1.标本获取:对于深部组织感染或疑有组织侵袭的情况,通过手术等方式获取病变组织,如肺组织、肝组织等。2.切片与染色:将组织制成病理切片,常用苏木精-伊红(HE)染色或过碘酸-雪夫(PAS)染色等。PAS染色可使真菌呈红色,在显微镜下能清晰观察组织内真菌的形态、分布及侵袭情况,有助于判断感染的深度和范围,尤其对深部真菌感染的诊断有重要价值。
四、血清学检查
1.检测指标:检测真菌相关的抗体或抗原,例如检测隐球菌荚膜多糖抗原、曲霉菌半乳甘露聚糖抗原等。以隐球菌血清学检查为例,通过特定的免疫学方法检测血清中的隐球菌抗原,对隐球菌感染有辅助诊断意义,但血清学检查存在一定局限性,如可能出现假阳性或假阴性结果,需结合临床其他检查综合判断。
五、分子生物学检查
1.PCR技术:利用聚合酶链式反应检测标本中的真菌核酸,通过扩增真菌特异性的DNA片段来检测是否存在真菌感染。该方法灵敏度和特异性较高,能快速检测出标本中的微量真菌核酸,尤其适用于早期、疑难真菌感染的诊断,但对实验室条件要求较高,且需注意避免污染导致假阳性结果。对于特殊人群,如儿童,在标本采集时要由专业医护人员轻柔操作,减少患儿不适;老年人若合并心脑血管等基础疾病,进行检查前需评估其心肺功能等耐受情况,确保检查安全进行。