大肠杆菌怎么检测

大肠杆菌检测包括标本采集，粪便标本取新鲜黏液脓血部分用无菌容器尽快送检儿童操作轻柔，尿液标本采清洁中段尿注意清洁外阴或尿道口；实验室检测有分离培养鉴定用伊红美蓝琼脂及生化试验、免疫学检测用酶联免疫吸附试验、分子生物学检测用聚合酶链式反应；不同人群检测需注意，儿童采集要安抚和合适操作，特殊病史人群采集要评估身体状况防止不适或加重病情。

一、标本采集

（一）粪便标本采集

对于怀疑肠道大肠杆菌感染的患者，需采集新鲜粪便的黏液脓血部分，采集时要确保标本无污染，采用无菌容器收集，尽快送检，避免标本放置过久影响检测结果。儿童采集时需注意操作轻柔，防止因不适导致标本采集不规范。

（二）尿液标本采集

检测泌尿系统大肠杆菌感染时，应采集清洁中段尿，女性需注意清洁外阴后采集，男性要翻转包皮清洁尿道口后采集，以减少外源性杂菌污染，保证标本的准确性。

二、实验室检测方法

（一）分离培养鉴定

1.培养基选择：常用伊红美蓝琼脂（EMB），大肠杆菌在EMB培养基上可形成黑色金属光泽的菌落，这是因为大肠杆菌发酵乳糖产酸，使伊红美蓝结合形成黑色。

2.生化试验鉴定：挑取疑似菌落进行生化试验，如吲哚试验（大肠杆菌吲哚试验阳性）、甲基红试验（阳性）、VP试验（阴性）、枸橼酸盐利用试验（阴性）等，通过一系列生化反应来确认为大肠杆菌。

（二）免疫学检测

利用抗原抗体特异性结合原理，如酶联免疫吸附试验（ELISA），可针对大肠杆菌的特定抗原进行检测。将大肠杆菌抗原包被在固相载体上，加入待检标本，若标本中存在相应抗体则会形成抗原-抗体复合物，再通过酶催化显色反应来判断是否存在大肠杆菌，该方法具有快速、灵敏的特点。

（三）分子生物学检测

聚合酶链式反应（PCR）是常用的分子生物学检测方法，通过设计大肠杆菌特异性的引物，扩增其基因组中的特定核酸片段。例如针对大肠杆菌16SrRNA基因等保守区域设计引物，进行PCR扩增后，通过电泳等方法检测扩增产物，从而准确判断样本中是否存在大肠杆菌，该方法特异性强、灵敏度高，能快速检测出极少量的大肠杆菌。

三、不同人群检测注意事项

（一）儿童

儿童采集标本时需特别注意安抚，避免因哭闹导致标本采集量不足或污染。如粪便标本采集，要选择合适大小的无菌容器，轻柔操作以获取有效的检测标本；尿液标本采集时，要做好局部清洁，根据儿童年龄特点选择合适的采集方式，确保标本符合检测要求。

（二）特殊病史人群

对于有肠道手术史、免疫功能低下等特殊病史的人群，采集标本时要充分评估其身体状况，防止采集过程中引发不适或加重病情。例如免疫功能低下者采集粪便标本时，要注意操作的无菌性和轻柔性，避免造成肠道损伤等不良后果。