病情描述:皮肤丝状真菌染色
副主任医师 复旦大学附属华山医院
常用皮肤丝状真菌染色包括乳酸酚棉蓝染色(棉蓝与真菌细胞壁几丁质结合着色、乳酸保湿、酚杀菌防腐)和革兰染色(依真菌细胞壁成分经多步骤显色),采集标本要兼顾不同人群操作及部位规范且及时处理防污染,染色需控染液浓度和时间,其对明确真菌感染病原体类型至关重要,可辅助诊多种疾病,年龄因素儿童易感染需关注操作,病史有抗真菌药使用史可能致显色异常,需结合临床检查为制定针对性抗真菌治疗方案提供依据。
一、常用皮肤丝状真菌染色方法及原理
1.乳酸酚棉蓝染色:利用棉蓝能与真菌细胞壁的几丁质结合实现着色,乳酸具备保湿功效,酚有杀菌防腐作用。操作时取患者皮损处皮屑、毛发或甲屑等标本,置于载玻片上,滴加适量乳酸酚棉蓝染液,覆盖盖玻片并轻压后镜检,可清晰呈现真菌的菌丝和孢子形态。例如,在观察头癣患者的病发时,能借助该染色清晰看到菌丝侵入毛发的情况。
2.革兰染色:依据真菌细胞壁成分与革兰染色液的反应特性,经结晶紫初染、碘液媒染、乙醇脱色、沙黄复染等步骤,使真菌结构显色,便于在显微镜下识别菌丝和孢子的形态特征。比如在鉴别皮肤癣菌的菌丝结构时,革兰染色可呈现出特定的染色形态以辅助诊断。
二、染色操作步骤要点
采集标本时,对于儿童患者需轻柔操作,避免引起患儿不适,如采集儿童头皮癣标本时动作要轻缓;不同性别在标本采集部位有不同注意事项,女性会阴部真菌感染标本采集要兼顾隐私与规范操作。采集后的标本需及时处理,防止污染影响染色结果。染色过程中严格把控染液浓度和染色时间,保证染色效果清晰,利于准确观察真菌形态,例如染液浓度过高可能导致菌丝过度着色难以分辨细节,浓度过低则显色不明显。
三、临床意义及相关因素影响
皮肤丝状真菌染色对明确真菌感染的病原体类型至关重要,可辅助诊断头癣、体癣、股癣、甲癣等疾病。从年龄因素看,儿童皮肤屏障功能未完全发育成熟,更易感染皮肤丝状真菌,染色时要关注儿童皮肤状态,谨慎操作;从病史角度,若患者近期有抗真菌药物使用史,可能使真菌在染色中显色异常,出现假阴性或不典型表现,此时需结合临床其他检查综合判断。通过准确染色为临床制定针对性抗真菌治疗方案提供依据,不同患者依自身情况(年龄、性别、病史等)调整诊疗策略,以提升治疗效果,如儿童患者优先考虑温和的抗真菌措施,避免使用可能对儿童有潜在不良影响的药物。