查精子成活率的方法

精液检查包括采集、显微镜检查、染色法辅助检查及其他辅助检查。采集前禁欲2-7天、洗净外生殖器，用手淫等法收集；显微镜检查需处理样本后观察精子形态活力；染色法用染色剂辅助区分活死精子；CASA系统可自动检测分析精子运动参数评估成活率，各步骤有相应要求及注意事项。

一、精液采集

1.采集前准备

采集精液前需要禁欲2-7天，禁欲时间过短或过长都会影响精子成活率的检测结果。例如，禁欲时间短可能导致精子数量不足，而禁欲时间过长则可能使精子活力下降。对于不同生活方式的人，如长期熬夜、吸烟饮酒的男性，更要严格遵循禁欲时间要求，因为不良生活方式可能已经对精子质量产生影响，禁欲时间不准确会干扰检测结果。

采集精液前应洗净双手和外生殖器，避免污染精液样本。

2.采集方法

一般采用手淫法采集精液，将精液收集到清洁、干燥的容器中。对于一些因特殊原因无法手淫采集的患者，可以使用专门的体外射精装置采集，但要确保精液完整收集且不受污染。

二、显微镜检查法

1.样本处理

将收集到的精液样本在实验室中进行适当处理，通常是将精液样本稀释，使精子分布更均匀，便于计数和观察。稀释液的成分和浓度要符合标准，以保证精子的活性在检测过程中不受影响。

2.显微镜观察

使用光学显微镜观察精子的形态和活力。精子成活率是指活精子的比例，通过在显微镜下计数一定数量的精子中活精子的数量来计算成活率。正常情况下，精子成活率应大于58％。在观察过程中，要注意不同年龄、病史等因素对精子成活率的影响。例如，有生殖系统炎症病史的男性，其精子成活率可能会降低，在观察时需要更加仔细地鉴别活精子和死精子。死精子通常表现为精子形态异常、无运动能力或细胞膜完整性受损等。

三、染色法辅助检查

1.染色原理

可以使用染色剂对精液样本进行染色，常用的染色剂如伊红-亚甲蓝染色等。活精子的细胞膜具有完整性，染色剂不易进入，而死精子的细胞膜完整性受损，染色剂能够进入并使精子着色。通过染色后在显微镜下观察着色情况，可以更准确地区分活精子和死精子，从而更精确地计算精子成活率。对于一些精子形态难以通过常规显微镜观察准确判断的情况，染色法能提供更清晰的区分依据。

2.操作步骤

取适量精液样本与染色剂按一定比例混合，放置一段时间后制片，然后在显微镜下观察。操作过程中要严格控制染色时间和染色剂浓度，不同年龄的男性，由于生殖系统的生理差异，可能需要对染色条件进行适当调整，以确保染色效果准确，进而得到可靠的精子成活率结果。

四、其他辅助检查方法

1.计算机辅助精液分析（CASA）

原理与优势：CASA系统利用计算机图像分析技术对精子进行自动检测和分析。它可以快速、准确地测量精子的运动参数，如精子的运动速度、运动轨迹等，从而更全面地评估精子成活率和精子质量。该技术能够减少人为观察的误差，对于不同年龄和病史的男性都能提供较为客观的精子运动相关数据。例如，对于患有精索静脉曲张病史的男性，CASA系统可以更精准地检测出其精子运动参数的变化，从而辅助判断精子成活率情况。

操作流程：将精液样本放入CASA系统的样本池，系统通过摄像头拍摄精子的运动图像，然后对图像进行分析处理，计算出各项精子运动指标，进而得出精子成活率等相关参数。在操作过程中，要确保样本放置位置正确，避免样本污染等情况影响检测结果。