真菌感染检查

标本采集分不同部位，皮肤真菌感染采病变边缘鳞屑痂皮等且操作需无菌，深部真菌感染按感染部位精准获取标本如肺部采痰液等、尿液采清洁中段尿等；实验室检测有直接显微镜检查的氢氧化钾涂片法可观察菌丝孢子、特殊染色法用于无菌体液检测，真菌培养接种标本于适宜培养基观察菌落形态是诊断金标准之一，分子生物学检测的PCR可早期发现真菌DNA、实时荧光定量PCR提升灵敏度与定量能力但技术要求高。

一、标本采集

1.不同部位标本采集要点：

皮肤真菌感染：采集病变边缘的鳞屑、痂皮等，操作时需无菌，避免标本被污染，以保证检测准确性。例如检测皮肤癣菌时，通过获取病变边缘样本，利用显微镜观察菌丝和孢子形态初步判断。

深部真菌感染：肺部感染可采集痰液、支气管肺泡灌洗液；尿液感染采集清洁中段尿等。采集时需依据感染部位精准获取标本，如儿童采集尿液时要轻柔操作，防止污染并确保标本量足够。

二、实验室检测方法

1.直接显微镜检查：

氢氧化钾涂片法：处理标本后用氢氧化钾涂片，显微镜下观察菌丝或孢子。如检测皮肤癣菌时，氢氧化钾溶解角质，可清晰见菌丝和孢子结构，此方法快速简便，但准确性受标本质量和检测者经验影响。

特殊染色法：血液等无菌体液检测可用革兰染色、墨汁染色等。墨汁染色用于检测隐球菌，可见具宽厚荚膜的菌体；革兰染色可区分真菌与细菌形态。

2.真菌培养：

将标本接种至沙保弱培养基等，置于25-30℃适宜环境培养，观察菌落形态。白色念珠菌菌落呈奶油色、表面光滑，曲霉菌落呈绒毛状等。培养法是诊断金标准之一，但培养时间长，一般需3-7天甚至更久。免疫功能低下人群（如艾滋病患者）合并真菌感染时，培养需严格控污染，确保结果准确。

3.分子生物学检测：

聚合酶链反应（PCR）：检测真菌核酸，具高敏特异性。如检测侵袭性曲霉感染，可早期发现真菌DNA，比传统培养早，但需结合临床症状防假阳性/阴性。儿童等特殊人群应用时需控样本采集和检测质量。

实时荧光定量PCR：提升检测灵敏度与定量能力，精准反映真菌感染程度，但技术要求高，需专业设备与人员操作。