病情描述:如何进行婴儿肠道菌群的化验
副主任医师 福建医科大学附属协和医院
婴儿肠道菌群化验采集粪便样本需用清洁干燥无菌容器且尽快送检或冷藏保存防菌群变化,检测方法有局限性大的培养法和以16SrRNA基因测序为例的分子生物学方法(含DNA提取、PCR扩增、测序分析),可评估肠道菌群健康状态,特殊人群采集要轻柔迅速并遵无菌操作以保检测准确为判断肠道健康及干预提供依据。
一、样本采集
婴儿肠道菌群化验通常采集粪便样本,采集时需注意:一是使用清洁、干燥且无菌的容器,避免样本被外界杂菌污染;二是采集量一般为几克左右,应尽快送检,若不能及时送检需妥善保存(如冷藏条件下短时间保存),防止样本中菌群组成发生变化影响检测结果。
二、检测方法
(一)培养法
将粪便样本接种至特定的细菌培养基上,在适宜的温度、湿度等条件下培养,观察细菌生长情况,从而初步判断可培养细菌的种类及数量。但该方法局限性较大,仅能检测出可在特定培养基上生长的细菌,无法涵盖所有肠道菌群种类。
(二)分子生物学方法(以16SrRNA基因测序为例)
1.DNA提取:提取粪便样本中的总DNA,此过程需确保高效且完整地获取菌群的遗传物质。
2.PCR扩增:针对细菌16SrRNA基因的特定区域进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,获取足够量的目标DNA片段。
3.测序分析:通过测序技术对扩增后的DNA片段进行测序,然后利用生物信息学工具对测序数据进行分析,确定肠道菌群中细菌的种类、相对丰度等情况,能够较为全面地揭示肠道菌群的组成结构。
三、临床意义及特殊人群注意事项
通过婴儿肠道菌群化验可评估肠道菌群是否处于健康状态,如是否存在菌群失调等情况。对于婴儿这一特殊人群,采集样本时要格外轻柔、迅速,避免婴儿因不适产生哭闹等情况影响样本采集的顺利进行,同时要严格遵循样本采集的无菌操作要求,最大程度保证检测结果的准确性,为判断婴儿肠道健康状况及后续可能的干预提供依据。